日本午夜啪啪丨亚洲老子午夜电影理论丨亚洲人成网站18禁止中文字幕丨国产永久久丨中文无码天天av天天爽丨伊人情人色综合网站丨日韩亚洲一区二区丨色爱av丨成人免费毛片明星色大师丨亚洲一区二区免费看丨日韩女优网站丨5151精品国产人成在线观看丨私人成片免费观看丨爱情岛成人18丨四十如虎的丰满熟妇啪啪丨日韩不卡1卡2卡三卡2021免费丨亚洲永久网站丨夜夜嗨网站丨超碰人人搞丨内射中出无码护士在线丨午夜性刺激在线视频免费丨日本精品成人一区二区三区视频丨91porny九色丨麻豆精品丨国产mv欧美mv日产mv免费

小鼠補體（C）ELISA試劑盒說明書

本試劑僅供研究使用 目的：本試劑盒用于測定小鼠血清，血漿及相關液體樣本中補體（C）含量。提供免費代檢測服務。
實驗原理：
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠補體（C）水平。用純化的小鼠補體（C）
抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入補體 （C），再與 HRP 標
記的補體 （C）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB
顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深
淺和樣品中的補體 （C）呈正相關。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度（OD 值），通過
標準曲線計算樣品中小鼠補體 （C）濃度。
試劑盒組成：
試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存
說明書 1 份 1份
封板膜 2片（48） 2片（96）
密封袋 1 個 1個
酶標包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
標準品：45μg/ml 0.5ml×1 瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存
酶標試劑 3ml×1 瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
樣品稀釋液 3ml×1 瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑 A 液 3ml×1 瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑 B 液 3ml×1 瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
終止液 3ml×1 瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存
濃縮洗滌液 （20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存
樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固 10-20 分鐘，離心 20分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上
清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。
2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇 EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合 10-20 分鐘后，離心
20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次
離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程
中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心 20分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/
分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用 PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞
1

濃度達到 100萬/ml 左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心 20 分
鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的 PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)?br />用。標本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS（PH7.4），用手工或勻漿器
將標本勻漿充分。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待
檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上
進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含 NaN3的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔 10孔，在*、第二孔中分別加標
準品 100μl，然后在*、第二孔中加標準品稀釋液 50μl，混勻；然后從*孔、第二
孔中各取 100μl 分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液 50μl，
混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取 50μl 棄掉，再各取 50μl 分別加到第五、第六孔
中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液 50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各
取 50μl 分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液 50μl，混
勻后從第七、第八孔中分別取 50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準
品稀釋液 50μl，混勻后從第九第十孔中各取 50μl 棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為 50μl，
濃度分別為 30μg/ml，20μg/ml ，10μg/ml，5μg/ml， 2.5μg/ml）。
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣
品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl（樣
品zui終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混
勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30分鐘。
4. 配液：將 20倍濃縮洗滌液用蒸餾水 20 倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此
重復 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑 50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同 3。
8. 洗滌：操作同 5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止
液后 15分鐘以內(nèi)進行。
注意事項：
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未
用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在 5 分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本 OD 值
大于標準品孔*孔的 OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
2

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。
計算：
以標準物的濃度為橫坐標，OD 值為縱坐標，
在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的 OD
值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋
倍數(shù)；或用標準物的濃度與 OD 值計算出標
準曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD 值
代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋
倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
試劑盒性能：
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù) R 值為 0.990以上。
2.批內(nèi)與批見應分別小于 9%和 11%
保存條件及有效期：
1.試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 個月