一、
氯霉素檢測(cè)具體實(shí)行步驟：
樣品制備
a)將3克已均質(zhì)的樣品放入15mL離心管中，再加入6mL乙酸乙酯，震蕩5分鐘。
b)用離心機(jī)離心1700×g10分鐘，取2mL上層液(乙酸乙酯)至10mL玻璃管中，于50℃下，利用氮?dú)鈱⒂袡C(jī)溶劑吹干。
c)在此玻璃管中加入正己烷1mL，先將殘余物*溶解后，再加入1mL樣品稀釋液，震蕩30秒鐘。
d)用離心機(jī)離心1700×g 10分鐘，利用吸管吸去包含中問(wèn)乳化層部分的上層液(正己烷)，再吸取下層液(水層)備用。
稀釋倍數(shù):1
若待測(cè)物為白蝦可按以下流程將樣品做8倍濃縮以增加檢品敏感度
a)將6克已均質(zhì)的樣品放入15mL離心管中，再加入6mL乙酸乙酯，震蕩5分鐘。
b)用離心機(jī)離心1700×g 10分鐘，取4mL上層液(乙酸乙酯)至10mL玻璃管中，于50℃下，利用氮?dú)鈱⒂袡C(jī)溶劑吹干。
c)在此玻璃管中加入正己烷2mL，先將殘余物*溶解后，再加入0.5mL樣品稀釋液，震蕩30秒鐘。
d)用離心機(jī)離心1700×g 10分鐘，利用吸管吸去包含中問(wèn)乳化層部分的上層液(正己烷)，再吸取下層液(水層)備用。
稀釋倍數(shù):0.125
二、氯霉素檢測(cè)的操作步驟：
1、于適當(dāng)微孔中分別加入100mL標(biāo)準(zhǔn)溶液(0，0.05，0.15，0.45，1.35和4.05ppb)。
2、在另外的微孔中加入100mL已完成前處理的樣品溶液。
3、再于每一微孔中另再加入50mL酶標(biāo)記物。
4、輕敲盤(pán)子四周，使其充分混合后于室溫下避光靜置溫育1小時(shí)。
5、將微孔中的反應(yīng)液甩掉，再將洗液加滿每一微孔后甩掉，重復(fù)洗3次。
6、較后一次甩掉后，在吸水紙上拍干。
7、于每一微孔中加入底物溶液100mL后，輕敲盤(pán)子四周，使其充分混合。
8、于室溫下避光靜置溫育20分鐘。
9、于每一微孔中加入100mL反應(yīng)終止液。
10、用酶標(biāo)儀于波長(zhǎng)450nm下判讀。
